Окрашивание по Папаниколау

Окраска по Папаниколау (англ. Papanicolaou stain, Pap stain) — цитологический метод окрашивания, разработанный Георгиосом Папаниколау в 1942 г.^[1] Окраска по Папаниколау является одним из наиболее широко используемых диагностических методов в цитологии. Этот метод окрашивания широко применяется для проведения Пап-теста (мазка Папаниколау), выявляющего рак шейки матки. Помимо гинекологических мазков, по методике Папаниколау окрашивают препараты мокроты, мочи, ликвора, плевральной жидкости, синовиальной жидкости, спермы, тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии и других биоматериалов^[2]. Папаниколау опубликовал три варианта окраски — в 1942, 1954 и 1960 г. На сегодняшний день существует множество модификаций^[3].

Как правило, для фиксации мазка применяются 95 % этанол. Реже применяется 100 % метанол, 80 % изопропанол или 80 % пропанол. Мазки фиксируются в течение 20-30 минут^[4].

Классическая процедура окраски по Папаниколау включает пять окрашиваний в трех растворах.

• Первый раствор содержит гематоксилин, который окрашивает клеточные ядра.
• Второй окрашивающий раствор (OG-6) содержит Оранжевый Ж в 95 % этаноле с небольшим количеством фосфорновольфрамовой кислоты.
• Третий окрашивающий раствор состоит из трех красителей: эозина Y, Светло-зеленого SF желтоватого^[англ.] и Красителя Бисмарка Коричневого Y^[англ.] в 95 % этиловом спирте с небольшим количеством фосфорновольфрамовой кислоты и карбоната лития^[3].

Сверхбыстрое окрашивание по Папаниколау — это альтернативный вариант процедуры окрашивания для препаратов тонкоигольной аспирационной пункционной биопсии. Процесс отличается регидратацией высушенного на воздухе мазка физраствором, использованием для фиксации 4 % формальдегида в 65 % этаноле, гематоксилин и коммерческий краситель Cyto-Stain^[англ.]. Данная модификация окрашивания по Папаниколау позволяет производить окраску препарата за 90 секунд^[5].

В результате окрашивания по Папаниколау клетки остаются прозрачными. Ядра клеток принимают цвет от синего до чёрного. Цитоплазма окрашивается в сине-зеленый цвет; кератин — в оранжевый.

Эозин Y окрашивает поверхностный плоский эпителий, ядрышки, реснички и эритроциты. Светло-зеленый SF желтоватый^[англ.] придает голубое окрашивание цитоплазме призматических, парабазальных плоских и промежуточных плоских клеток. Поверхностные клетки окрашиваются от оранжевого до розового, а промежуточные и парабазальные клетки становятся бирюзово-зелеными или голубыми^[6].

• 
  Плоскоклеточная карцинома, бронхоальвеолярный лаваж.
• 
  Клетки меланомы, тонкоигольная аспирационная пункционная биопсия печени.
• 
  Трёхполюсный митоз в препарате бронхоальвеолярного лаважа.
• 
  Папиллярный рак щитовидной железы, тонкоигольная аспирационная биопсия.
• 
  Плоскоклеточная карцинома шейки матки.
• 
  Филяриевидная личинка при стронгилоидозе в препарате бронхоальвеолярного лаважа.

• Окраска по Май-Грюнвальду