"RT-PCR" đổi hướng tới đây. Đối với RT-PCR (định hướng), xem RT-PCR (định hướng).
RT-PCR
Phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase sao chép ngược (RT-PCR) (tiếng Anh: Reverse transcription polymerase chain reaction) là một kỹ thuật trong phòng thí nghiệm kết hợp giữa sao chép ngược (phiên mã ngược) RNA thành DNA (trong bối cảnh này được gọi là DNA bổ sung hoặc cDNA) và khuếch đại các mục tiêu DNA cụ thể bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR).[1] Nó chủ yếu được sử dụng để đo lượng RNA cụ thể. Điều này đạt được bằng cách theo dõi phản ứng khuếch đại bằng huỳnh quang, một kỹ thuật gọi là PCR thời gian thực, còn gọi là PCR định lượng (qPCR). Phương pháp kết hợp RT-PCR và qPCR với nhau thường được sử dụng để phân tích biểu hiện gen và định lượng RNA của virus trong các nghiên cứu và thực nghiệm lâm sàng.
Đầu dò Taqman
Sự kết hợp chặt chẽ giữa RT-PCR và qPCR đã dẫn đến việc sử dụng một cách hoán dụ thuật ngữ qPCR với nghĩa là RT-PCR. Việc sử dụng như vậy có thể gây nhầm lẫn,[2] vì RT-PCR có thể được sử dụng mà không cần đến qPCR, ví dụ để cho phép nhân bản phân tử, giải trình tự gen hoặc phát hiện RNA đơn giản. Ngược lại, qPCR có thể được sử dụng mà không cần đến RT-PCR, ví dụ để định lượng số lượng bản sao của một đoạn DNA cụ thể.
Danh pháp
RT-PCR một bước so sánh với RT-PCR hai bước
Kỹ thuật RT-PCR và qPCR sử dụng kết hợp với nhau được gọi là RT-PCR định lượng[3] hoặc RT-PCR thời gian thực[4] (đôi khi cũng được gọi là RT-PCR định lượng thời gian thực),[5] thường được viết tắt là qRT-PCR,[6]RT-qPCR,[7] hoặc rRT-PCR.[8] Để tránh nhầm lẫn, các chữ viết tắt sau sẽ được sử dụng nhất quán:
^Kang XP, Jiang T, Li YQ, và đồng nghiệp (2010). "A duplex real-time RT-PCR assay for detecting H5N1 avian influenza virus and pandemic H1N1 influenza virus". Virol. J. Quyển 7. tr. 113. doi:10.1186/1743-422X-7-113. PMC2892456. PMID20515509.{{Chú thích tạp chí}}: Quản lý CS1: DOI truy cập mở nhưng không được đánh ký hiệu (liên kết)
^Taylor S, Wakem M, Dijkman G, Alsarraj M, Nguyen M (tháng 4 năm 2010). "A practical approach to RT-qPCR-Publishing data that conform to the MIQE guidelines". Methods. Quyển 50 số 4. tr. S1–5. doi:10.1016/j.ymeth.2010.01.005. PMID20215014.
