生物组织光学窗口 [ 1] (或近紅外窗口 、治療窗口 )指的是光 在生物组织内穿透深度达到最大值的波长 区间,一般处于近红外 波长范围内。在可见-近红外波段 ,散射 是光与组织间最主要的作用形式,导致光在传播过程中迅速弥散。由于散射增大了光子 在组织内的传播距离,因而光子为组织所吸收的概率也随之增大。实际上,散射效应随波长变化很小,因此,生物组织光学窗口的范围主要受限于组织的吸收,其下限(短波长一端)由血液 吸收所决定,上限(长波长一端)则由水 的吸收所决定。对于光学成像 和光热 治疗 等应用而言,选择位于光学窗口波长范围内的合适光源,对于提高成像(治疗)效率、提高穿透深度、降低光致组织损伤,有着十分重要的意义。
生物组织各组分的吸收
图1: 氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的摩尔消光系数[ 2] 。
吸收系数(
μ
a
{\displaystyle \mu _{a}\,}
)指光子通过单位距离时被吸收的概率[ 3] 。组织的不同组分有着不同的
μ
a
{\displaystyle \mu _{a}\,}
值;同时,
μ
a
{\displaystyle \mu _{a}\,}
还是波长的函数。另外,摩尔消光系数(
ε
{\displaystyle \varepsilon \,}
)也是用来衡量组织吸收性质的重要参数,可以从
μ
a
{\displaystyle \mu _{a}\,}
计算得到。组织内不同发色团 的吸收性质将在下面讨论。
血液
血液中含有两种形式的血红蛋白 :氧合血红蛋白 (
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
)与氧 分子结合,而脱氧血红蛋白 (
H
b
{\displaystyle Hb\,}
) 则不与氧分子结合。图1显示了归一化 后的氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的吸收光谱 。在420纳米、580纳米处,(
H
b
{\displaystyle Hb\,}
) 分别达到最大和次大的摩尔消光系数峰值,在580纳米以上其消光则随波长上升而下降;(
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
)表现出类似的趋势,不同的是其在410纳米处达到最大消光峰,在550纳米和600纳米处达到次大消光峰。而在600纳米以上波长,(
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
)摩尔消光系数的降低要比(
H
b
{\displaystyle Hb\,}
) 更快。
H
b
{\displaystyle Hb\,}
与
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
摩尔消光系数曲线相交的点称为等吸收点 。
原则上,通过测定一份血样在两个不同波长下的吸收系数,就可以根据下式计算出血样中氧合血样蛋白
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
和脱氧血红蛋白
H
b
{\displaystyle Hb\,}
的浓度:
μ
a
(
λ
1
)
=
ln
(
10
)
ε
H
b
O
2
(
λ
1
)
C
H
b
O
2
+
ln
(
10
)
ε
H
b
(
λ
1
)
C
H
b
{\displaystyle \mu _{a}(\lambda _{1})=\ln(10)\varepsilon _{HbO2}(\lambda _{1})C_{HbO2}+\ln(10)\varepsilon _{Hb}(\lambda _{1})C_{Hb}\,}
μ
a
(
λ
2
)
=
ln
(
10
)
ε
H
b
O
2
(
λ
2
)
C
H
b
O
2
+
ln
(
10
)
ε
H
b
(
λ
2
)
C
H
b
{\displaystyle \mu _{a}(\lambda _{2})=\ln(10)\varepsilon _{HbO2}(\lambda _{2})C_{HbO2}+\ln(10)\varepsilon _{Hb}(\lambda _{2})C_{Hb}\,}
图2: 水的吸收光谱[ 4] 。
其中,
λ
1
{\displaystyle \lambda _{1}\,}
和
λ
2
{\displaystyle \lambda _{2}\,}
表示两个不同的波长;
ε
H
b
O
2
{\displaystyle \varepsilon _{HbO2}\,}
和
ε
H
b
{\displaystyle \varepsilon _{Hb}\,}
分别是
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
和
H
b
{\displaystyle Hb\,}
的摩尔消光系数;
C
H
b
O
2
{\displaystyle C_{HbO2}\,}
和
C
H
b
{\displaystyle C_{Hb}\,}
则分别是
H
b
O
2
{\displaystyle HbO_{2}\,}
和
H
b
{\displaystyle Hb\,}
的浓度。血氧饱和度 (
S
O
2
{\displaystyle SO_{2}\,}
)可表示为
S
O
2
=
C
H
b
O
2
C
H
b
O
2
+
C
H
b
{\displaystyle SO_{2}={\frac {C_{HbO2}}{C_{HbO2}+C_{Hb}}}}
水
尽管水对于可见光 几乎透明,但在近红外区则有着较强的吸收。考虑到组织中水所占的比例之高,水也就成了影响组织光学穿透性的关键组分之一。水在250-1000纳米范围内的吸收光谱见图2。
对组织总吸收贡献较小的其他组分则包括了黑色素和脂肪等。
图3: 真黑色素和褐黑素的消光光谱[ 5] 。
黑色素
黑色素 是一种存在于皮肤中表皮层 内的发色团,能够避免组织受到有害的紫外线 照射。当黑素细胞受到阳光照射刺激时,就会产生黑色素[ 6] 。在某些组分中,黑色素是最强的光吸收体,不过由于浓度较低,其对总吸收的贡献往往小于其他组分。黑色素可以分为两类:黑/棕色的真黑色素 和红/黄色的褐黑素 [ 7] 。二者的消光光谱见图3。
脂肪
尽管吸收较弱,脂肪 也是组织中浓度较高的组分之一(10%-40%)。哺乳动物的脂肪吸收光谱很少被报道,图4显示了经过提纯的猪油的吸收光谱。
图4: 猪油的吸收光谱[ 8] 。
生物组织各组分的散射
光学散射发生在组织内部折射率 发生变化处,而这可能出现在从细胞膜到细胞内部的任何地方。一般来说,细胞核 和线粒体 是细胞中最重要的散射体[ 3] ,这些散射体的尺寸可以从100纳米至6微米不等。而这类在细胞器上发生的散射大多是前向散射[ 6] 。
生物组织内的散射一般用散射系数来表示。与吸收系数的定义相似,它指的是光子在穿过单位距离时发生散射的概率。
有效衰减系数
组织吸收与散射所导致的光衰减可以用有效衰减系数 (
μ
e
f
f
{\displaystyle \mu _{eff}\,}
)表示:
μ
e
f
f
=
3
μ
a
(
μ
a
+
μ
s
′
)
{\displaystyle \mu _{eff}={\sqrt {3\mu _{a}(\mu _{a}+\mu '_{s})}}}
图5: 传播散射系数随波长的变化(人类乳房组织)[ 9] 。
其中
μ
s
′
{\displaystyle \mu _{s}^{'}}
称为传播散射系数,定义为
μ
s
′
=
μ
s
(
1
−
g
)
{\displaystyle \mu '_{s}=\mu _{s}(1-g)\,}
这里
g
{\displaystyle g}
表示组织的各向异性 ,一个典型的取值是0.9。图5显示了乳房组织中的传播散射系数随波长的变化,可以看出该系数与波长见大致存在
λ
−
0.7
{\displaystyle \lambda \,^{-0.7}}
[ 9] 的依赖关系。当组织深度较深(
d
{\displaystyle d\,}
>> 1/
μ
s
′
{\displaystyle \mu '_{s}\,}
)时,有效衰减系数的大小将决定光在组织内的穿透深度。
生物组织光学窗口范围的估计
基于组织吸收光谱或有效衰减系数光谱,可以对光学窗口的范围加以估计。具体说来,在不同类型组织中,光学窗口的范围也会有一定的变化。这不仅是由于不同组织中的血红蛋白总含量不同,也与不同组织中的血氧饱和度 差异关系甚大。以下是几个例子,在这些例子中血红蛋白浓度均假定为2.3毫摩尔/升。
图6a: 动脉的吸收光谱(SaO
2 ≈ 98%).
吸收系数最小值点λmin = 686 nm; 光学窗口 = (634 - 756) nm.
有效衰减系数最小值点λ
min = 690 nm;
光学窗口 = (618 - 926) nm.
图6b: 静脉的吸收光谱(SvO
2 ≈ 60%).
吸收系数最小值点λmin = 730 nm; 光学窗口 = (664 - 932) nm.
有效衰减系数最小值点λ
min = 730 nm;
光学窗口 = (630 - 1328) nm.
图6c: 乳房组织的吸收光谱(StO
2 ≈ 70%).
吸收系数最小值点λmin = 730 nm; 光学窗口 = (656 - 916) nm.
有效衰减系数最小值点λ
min = 730 nm;
光学窗口 = (626 - 1316) nm.
动脉 的吸收光谱 :
S
a
O
2
{\displaystyle SaO_{2}\,}
≈ 98%(动脉血氧饱和度)。在此情形下氧合血红蛋白占据主导地位,其吸收对吸收光谱(黑线)和有效衰减系数光谱(紫线)都提供了主要的贡献(见图6a)。
静脉 的吸收光谱 :
S
v
O
2
{\displaystyle SvO_{2}\,}
≈ 60%(静脉血氧饱和度)。在此情形下氧合血红蛋白与脱氧血红蛋白的贡献相当。
乳房 组织的吸收光谱 :要定义
S
t
O
2
{\displaystyle StO_{2}\,}
(乳房组织的血样饱和度),就需要先了解该组织中动脉血和静脉血的比例。这里采用了动脉血和静脉血之比为20%/80%的经验数字[ 10] 。这样就可以计算出总的血样饱和度为
S
t
O
2
{\displaystyle StO_{2}\,}
= 0.2 x
S
a
O
2
{\displaystyle SaO_{2}\,}
+ 0.8 x
S
v
O
2
{\displaystyle SvO_{2}\,}
≈ 70%。
得到上述吸收光谱或有效衰减系数光谱后,通过取倒数 就可以获得有效穿透深度曲线(如图7)。判断光学窗口范围的一个有效方法即截取该曲线的半峰全宽 。
图7: 乳房组织的有效穿透深度光谱。
参见
光学窗口
参考文献
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