N-Этилмалеимид

N-​Этилмалеимид
Общие
Систематическое наименование	1-​Этилпиррол-​2,5-​дион
Сокращения	НЭМ
Традиционные названия	Этилмалеимид
Хим. формула	C6H7NO2
Физические свойства
Молярная масса	125,12528 г/моль
Термические свойства
Температура
• плавления	43-46 °C
• кипения	210 °C
Классификация
Рег. номер CAS	128-53-0
PubChem	4362
Рег. номер EINECS	204-892-4
SMILES	O=C1\C=C/C(=O)N1CC
InChI	1/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3 HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N
ChEBI	44485
ChemSpider	4209
Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное.
Медиафайлы на Викискладе

N-Этилмалеимид (НЭМ) — производное малеиновой кислоты. Он содержит имидную функциональную группу и представляет собой активированный алкен, который реагирует с тиолами и часто используется для модификации остатков цистеина в белках и пептидах^[1].

N-Этилмалеимид является акцептором Михаэля. Это означает, что он может присоединять нуклеофилы, такие как тиолы. Образовавшийся в результате такой реакции тиоэфир обладает очень прочной C–S-связью, и реакция является практически необратимой. Реакция протекает при рН 6,5—7,5. N-этилмалеимид может реагировать с аминами или подвергаться гидролизу при более щелочных рН. N-этилмалеимид широко использовался для определения функциональной роли тиольных групп в энзимологии. Он является необратимым ингибитором всех цистеиновых пептидаз, поскольку осуществляет алкилирование тиольных групп в активном центре (см. схему)^[2][3].

НЭМ блокирует везикулярный транспорт. Лизисные буферы с 20—25 мМ N-этилмалеимида используются для ингибирования де-сумоилирования белков во время вестерн-блоттинга. НЭМ также используется в качестве ингибитора деубиквитинилирования.

Артур Корнберг и его коллеги использовали N-этилмалеимид, чтобы выключить ДНК-полимеразу III и сравнить её активность с ДНК-полимеразой I. Корнберг был удостоен Нобелевской премии за открытие ДНК-полимеразы I, которая в то время считалась главной полимеразой бактериальной репликации, хотя позже его сын Томас показал, что основной репликативной полимеразой у бактерий является ещё не открытая в то время ДНК-полимераза III.

N-Этилмалеимид активирует оуабаин-нечувствительное хлор-зависимое поступление ионов калия в красные кровяные тельца овец и коз^[4]. Шестнадцать лет спустя это открытие способствовало открытию K⁺/Cl^- котранспортёров в клетках человеческих эмбрионов, в которые ввели кДНК изоформы по KCC1^[5]. С тех пор N-этилмалеимид широко используется в качестве диагностического инструмента для определения наличия K⁺/Cl^- симпортов в клетках разных видов животных^[6][7][8][9].

• The MEROPS online database for peptidases and their inhibitors: NEM (недоступная ссылка)
• The bifunctional analogues such as p-NN'-phenylenebismaleimide can be used as cross-linking reagent for cystine residues. see Lutter, L. C., Zeichhardt, H., Kurland, C. G. & Stoffier,G. (1972) Mol. Gen. Genet. 119, 357-366.